Fasting/Refeeding Cycles Prevent Myocardial Dysfunction and Morphology Damage in the Spontaneously Hypertensive Rats / Ciclos de Jejum/Realimentação Previnem Disfunção Miocárdica e Danos Morfológicos em Ratos Espontaneamente Hipertensos

Abstract Background: Caloric restriction is known to impair the cardiac function and morphology in hypertrophied hearts of spontaneously hypertensive rats (SHR); however, the influence of fasting/refeeding (RF) is unknown. Objective: To investigate the fasting/refeeding approach on myocardial remodeling and function. In addition, the current study was designed to bring information regarding the mechanisms underlying the participation of Ca2+ handling and b-adrenergic system. Methods: Sixty-day-old male SHR rats were submitted to food ad libitum (C), 50% food restriction (R50) or RF cycles for 90 days. Cardiac remodeling was assessed by ultrastructure analysis and isolated papillary muscle function. The level of significance considered was 5% (a = 0.05). Results: The RF rats presented lower cardiac atrophy than R50 in relation to C rats. The C rats increased weight gain, R50 maintained their initial body weight and RF rats increased and decreased weight during RF. The RF did not cause functional impairment because the isotonic and isometric parameters showed similar behavior to those of C. The isotonic and isometric cardiac parameters were significantly elevated in RF rats compared to R50 rats. In addition, the R50 rats had cardiac damage in relation to C for isotonic and isometric variables. While the R50 rats showed focal changes in many muscle fibers, the RF rats displayed mild alterations, such as loss or disorganization of myofibrils. Conclusion: Fasting/refeeding promotes cardiac beneficial effects and attenuates myocardial injury caused by caloric restriction in SHR rats, contributing to reduce the cardiovascular risk profile and morphological injuries. Furthermore, RF promotes mild improvement in Ca2+ handling and b-adrenergic system.

Resumo Fundamento: A restrição calórica compromete a função e a morfologia cardíacas em corações hipertrofiados de ratos espontaneamente hipertensos (SHR). No entanto, a influência de ciclo de jejum/Realimentação é desconhecida. Objetivo: Investigar o efeito de ciclos de jejum/realimentação sobre a remodelação e função miocárdica. Além disso, o presente estudo foi desenhado para avaliar os mecanismos subjacentes à participação do trânsito de cálcio (Ca+2) e sistema beta-adrenérgico. Métodos: Neste estudo, SHR machos de 60 dias de idade foram submetidos a alimento ad libitum (grupo C), 50% de restrição alimentar (grupo R50) ou ciclos de RF (grupo RF) por 90 dias. A remodelação cardíaca foi avaliada por meio da análise ultraestrutural e função do músculo papilar isolado. Adotou-se o nível de significância de 5% (a = 0,05). Resultados: Os ratos do grupo RF apresentaram menor atrofia cardíaca do que os do grupo R50 em relação aos do grupo C. Os ratos do grupo C aumentaram peso corporal, os ratos do grupo R50 mantiveram seu peso corporal inicial e os ratos do grupo RF aumentaram e reduziram seu peso durante o ciclo RF. O ciclo RF não causou comprometimento funcional, pois os parâmetros isotônicos e isométricos apresentaram comportamento similar aos dos ratos do grupo C. Os parâmetros cardíacos isotônicos e isométricos mostraram-se significativamente elevados nos ratos do grupo RF em comparação aos dos ratos do grupo R50. Além disso, os ratos do grupo R50 apresentaram dano cardíaco em comparação aos ratos do grupo C quanto às variáveis isotônicas e isométricas. Os ratos do grupo R50 apresentaram alterações focais em muitas fibras musculares, enquanto os ratos do grupo RF apresentaram leves alterações, como perda ou desorganização de miofibrilas. Conclusão: Ciclos de Jejum/Realimentação promovem efeitos benéficos cardíacos e atenuam o dano miocárdico causado por restrição calórica em SHR, contribuindo para reduzir o risco cardiovascular e os danos morfológicos. Além disso, o ciclo de jejum/realimentação promove leve melhora do trânsito do Ca2+ e do sistema beta-adrenérgico.

Retainment of membrane binding capacity of non-palmitoylated Gs alpha mutants expressed in COS-1 cells

Heterotrimeric guanine nucleotide binding regulatory proteins (G proteins) transduce extracellular signals into intracellular signals by coupling receptors and effectors. Because most of the G protein-coupled receptors are integral proteins, the G proteins need to have a membrane binding capacity to receive signals from the receptors. The alpha subunit of G protein binds tightly to the cytoplasmic face of the plasma membrane without any membrane spanning domain. Fatty acylation of G alpha with myristic acid or palmitic acid, in addition to the beta gamma subunits, plays an important role in anchoring the G alpha subunit. The reversible and dynamic palmitoylation of the alpha subunit of stimulatory G protein (Gs alpha) has been suggested as essential for its membrane attachment. However, in our previous experiments, Gs alpha deleted in the amino terminus containing palmitoylation site, retained its binding capacity when expressed in COS cells. Thus, to evaluate the role of palmitoylation in Gs alpha membrane binding, we constructed and expressed non-palmitoylated mutants of Gs alpha and analyzed their subcellular distributions in COS-1 cells. We found that non-palmitoylated mutants of Gs alpha, C3S- and G2A/C3S Gs alpha, retained their membrane binding capacities in COS-1 cells, demonstrating that palmitoylation is not essential for membrane binding of Gs alpha in COS-1 cells. We also found that the palmitoylation did not change significantly the distribution of Gs alpha in Triton X-114 partition. These results suggest that the palmitoylation of Gs alpha may produce different effects on membrane binding depending on cell types.

Estudo comparativo das propriedades antimitótica e antiflogística do Imuran e das combinaçoës Imuran/Zyloric e Imuran/Dectancil / Antiphlogistic and antimitotic properties of Imuran and Imuran/Zyloric or Imuran/Dectancil combination

Foram utilzados 138 ratos para avaliar a intensidade e a correlaçäo dos efeitos antimitótico e antiflogístico do Imuran e sua associaçäo com o Zyloric e com o Dectancil. O efeito antiflogístico foi avaliado pelos testes edemogênico, contagem global e diferencial dos leucócitos e pelos fluxo de macrófagos em granulomas. O efeito antimitótico foi avaliado pela proliferaçäo das células das glândulas salivares e da medula óssea, estimuladas pelo isoproterenol. Com a associaçäo Imuran/Dectancil, obteve-se acentuado efeito antiflogístico e antimitótico. Conclui-se assim que ambos se correlacionaram no referido esquema terapêutico. O Imuran apresentou-se efetivo como droga antimitótica, e pouco eficiente em relaçäo ao efeito antiproliferativo e da açäo antilogística, de onde se conclui pela existência de uma correlaçäo positiva entre as drogas

Efecto de las variaciones del pH sobre la union de agonistas y antagonistas al receptor beta adrenergico / Effect of pH changes on agonists and antagonists binding to the adrenergic beta receptor

Se examinó en el sarcolema de corazones caninos el efecto del cambio de pH sobre la fijación específica de DHA-3H- y su desplazamiento por ligandos radiactivos. A valores bajos de pH (6.69) la afinidad de los receptores por los agonistas es menor que a pH 7.65, tanto para la noradrenalina como para el isoproterenol, produciendo un aumento de 1.5 veces en la constante de inhibición. El cambio en la afinidad fue atenuado agregando GTP 300 uM en el medio de incubación. Similares cambios de pH no afectan ni la afinidad de antagonistas (dihidroalprenolol, alprenolol, propranolol) por el receptor ß adrenérgico, ni el número de sitios de fijación determinado por la fijación de DHA-3H-. El efecto del pH sugiere que los iones H+ inducen en los receptores ß la formación de un estado de baja afinidad para los agonistas. Este mecanismo dependiente de la concentración de iones H+ podría ser capaz de regular el proceso por el cual los agonistas estimulan la adenil ciclasa